1. 標準曲線R2值驗證
?要求?：線性相關系數（R2）應≥0.99，表明濃度與信號值呈顯著線性關系。
?操作?：使用5-7個濃度點繪制標準曲線，采用四參數邏輯斯蒂（4-PL）擬合，若R2不達標需檢查標準品純度或稀釋精度。
2. 樣本基質適配性測試
?方法?：通過加標回收實驗驗證基質效應，回收率需在80%-120%之間。
?步驟?：
制備基礎樣本（待測樣本+空白基質）和加標樣本（加入高、中、低濃度標準液）。
同步檢測后計算回收率，若偏差超限需調整稀釋液或前處理步驟。
3. 干擾物質控制實驗
?常見干擾?：膽紅素、血紅蛋白等內源性物質可能抑制信號。
?解決方案?：使用含BSA的PBS稀釋樣本，或通過Youden曲線量化干擾程度。
4. 加標回收實驗
?操作?：
加標體積≤樣本體積10%，避免基質效應。
計算回收率：(測定濃度 - 基礎濃度) / 加入濃度 × 100%。
?標準?：平均回收率應在80%-120%內，且變異系數（CV）<15%。
?總結?：線性范圍達標需同時滿足R2≥0.99、回收率80%-120%、無顯著基質干擾。若未通過，需優化標準品配制或樣本前處理。