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SUMO2 ELISA試劑盒主要用于?體外定量檢測人血清、血漿、組織勻漿、細胞培養上清等樣本中的SUMO2蛋白含量?。其核心作用是通過酶聯免疫吸附實驗(ELISA)技術,利用雙抗體夾心法原理,實現對SUMO2蛋白的高靈敏度、高特異性檢測。
一、檢測原理
試劑盒采用?雙抗體夾心法?:用純化的SUMO2抗體包被微孔板,制成固相抗體;往包被單抗的微孔中依次加入樣本和HRP標記的SUMO2抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物;經過洗滌后加底物TMB顯色,TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,最終在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中SUMO2的含量呈正相關。
二、檢測范圍與靈敏度
?檢測范圍?:0.312-20ng/mL。
?靈敏度?:高靈敏度,適用于多種樣本類型。
三、樣本類型
?適用樣本?:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養上清、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
四、實驗注意事項
?洗滌?:不充分的洗滌會導致差異和高背景,必要時可增加洗滌液中的鹽濃度或洗滌次數。
?封閉?:封閉液的作用是降低非特異性結合,若背景過高,可嘗試使用更高濃度的封閉液或延長封閉時間。
?抗體濃度?:試劑稍有不同,可能需要優化抗體的量。
五、試劑盒選擇
?規格?:48T/盒、96T/盒。
?品牌?:國產。
?貨期?:現貨。
?有效期?:6個月。
六、實驗步驟
?樣本處理?:血清需室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
?加樣與孵育?:標準品和樣本加樣后,加入酶連接物和抗體溶液,室溫孵育1小時。
?洗板與顯色?:倒出液體后洗板,加入TMB顯色液,避光反應15分鐘。
?讀數?:加終止液后,450nm處讀OD值。
七、結果計算
?OD值處理?:建議減除空白孔值(若空白孔OD低于0.1可直接計算)。
?標準曲線?:以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,根據樣品OD值計算含量。
八、注意事項
?樣本處理?:樣本和標準品需做雙孔平行實驗。
?顯色后讀數?:顯色后5分鐘內讀數。
?儲存?:未開封的試劑盒所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。
一、檢測原理
試劑盒采用?雙抗體夾心法?:用純化的SUMO2抗體包被微孔板,制成固相抗體;往包被單抗的微孔中依次加入樣本和HRP標記的SUMO2抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物;經過洗滌后加底物TMB顯色,TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,最終在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中SUMO2的含量呈正相關。
二、檢測范圍與靈敏度
?檢測范圍?:0.312-20ng/mL。
?靈敏度?:高靈敏度,適用于多種樣本類型。
三、樣本類型
?適用樣本?:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養上清、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
四、實驗注意事項
?洗滌?:不充分的洗滌會導致差異和高背景,必要時可增加洗滌液中的鹽濃度或洗滌次數。
?封閉?:封閉液的作用是降低非特異性結合,若背景過高,可嘗試使用更高濃度的封閉液或延長封閉時間。
?抗體濃度?:試劑稍有不同,可能需要優化抗體的量。
五、試劑盒選擇
?規格?:48T/盒、96T/盒。
?品牌?:國產。
?貨期?:現貨。
?有效期?:6個月。
六、實驗步驟
?樣本處理?:血清需室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
?加樣與孵育?:標準品和樣本加樣后,加入酶連接物和抗體溶液,室溫孵育1小時。
?洗板與顯色?:倒出液體后洗板,加入TMB顯色液,避光反應15分鐘。
?讀數?:加終止液后,450nm處讀OD值。
七、結果計算
?OD值處理?:建議減除空白孔值(若空白孔OD低于0.1可直接計算)。
?標準曲線?:以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,根據樣品OD值計算含量。
八、注意事項
?樣本處理?:樣本和標準品需做雙孔平行實驗。
?顯色后讀數?:顯色后5分鐘內讀數。
?儲存?:未開封的試劑盒所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。
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