大鼠口腔粘膜成纖維細胞

大鼠口腔粘膜成纖維細胞分離自大鼠口腔粘膜固有層組織。口腔粘膜成纖維細胞是口腔粘膜固有層的主要功能細胞，具有合成和分泌膠原蛋白、彈性纖維及細胞外基質(zhì)的核心功能，在維持口腔粘膜結(jié)構(gòu)完整性、彈性與機械韌性，以及口腔粘膜損傷修復、創(chuàng)面愈合過程中發(fā)揮關鍵作用。其可分泌多種生長因子和細胞因子，調(diào)控口腔粘膜上皮細胞的增殖與分化，參與口腔微環(huán)境穩(wěn)態(tài)的維持；功能異常可能導致口腔粘膜潰瘍不愈、瘢痕增生、口腔粘膜纖維化等疾病。大鼠口腔粘膜成纖維細胞原代培養(yǎng)2-3天后開始貼壁，初始形態(tài)呈短梭形或不規(guī)則形；培養(yǎng)5-7天細胞逐漸匯合，呈長梭形，排列成旋渦狀或放射狀，細胞形態(tài)均一；傳代后細胞生長旺盛，3-4天即可匯合，且能穩(wěn)定維持成纖維細胞的典型形態(tài)學特征和生理功能。該細胞是研究口腔粘膜生理機制、口腔粘膜損傷修復、口腔纖維化發(fā)病機制及相關口腔疾病藥物篩選的理想實驗材料。

自備試劑：0.25%胰蛋白酶、膠原酶Ⅰ型、PBS緩沖液、完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基：大鼠口腔粘膜成纖維細胞完全培養(yǎng)基（含FBS、成纖維細胞生長因子、維生素C、Penicillin、Streptomycin等）

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁生長

細胞形態(tài)：長梭形、短梭形

傳代比例：1:2-1:3

傳代特性：可穩(wěn)定傳代6-8代；3-5代以內(nèi)細胞狀態(tài)最佳，功能最穩(wěn)定

消化液：0.25%胰蛋白酶

大鼠口腔粘膜成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介：實驗室采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備該細胞，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測：經(jīng)成纖維細胞特異性標志物（波形蛋白Vimentin、FSP1）免疫熒光鑒定，本細胞純度可達90%以上；經(jīng)細胞外基質(zhì)分泌檢測驗證細胞功能正常；經(jīng)檢測不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等外源污染物，細胞活性良好。