大鼠卵巢成纖維細胞

大鼠卵巢成纖維細胞分離自大鼠卵巢間質(zhì)組織。卵巢成纖維細胞是卵巢間質(zhì)的主要功能細胞，具有合成和分泌膠原蛋白、彈性纖維及細胞外基質(zhì)的核心功能，在維持卵巢組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、構(gòu)建卵泡生長發(fā)育微環(huán)境中發(fā)揮關(guān)鍵作用。其可分泌多種細胞因子和生長因子，調(diào)控卵泡的生長、發(fā)育與成熟，參與卵巢激素分泌的調(diào)節(jié)；功能異常可能導致卵泡發(fā)育障礙、卵巢早衰、多囊卵巢綜合征等生殖系統(tǒng)疾病。大鼠卵巢成纖維細胞原代培養(yǎng)2-3天后開始貼壁，初始形態(tài)呈短梭形或不規(guī)則形；培養(yǎng)5-7天細胞逐漸匯合，呈長梭形，排列成旋渦狀，細胞形態(tài)均一；傳代后細胞生長平穩(wěn)，3-4天即可匯合，且能穩(wěn)定維持成纖維細胞的典型形態(tài)學特征和生理功能。該細胞是研究卵巢生理機制、卵泡發(fā)育調(diào)控、卵巢相關(guān)疾病發(fā)病機制及生殖藥物篩選的理想實驗材料。

自備試劑：0.25%胰蛋白酶、膠原酶Ⅰ型、PBS緩沖液、完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基：大鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基（含FBS、成纖維細胞生長因子、雌激素、Penicillin、Streptomycin等）

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁生長

細胞形態(tài)：長梭形、短梭形

傳代比例：1:2-1:3

傳代特性：可穩(wěn)定傳代5-7代；3-4代以內(nèi)細胞狀態(tài)最佳，功能最穩(wěn)定

消化液：0.25%胰蛋白酶

大鼠卵巢成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介：實驗室采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備該細胞，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測：經(jīng)成纖維細胞特異性標志物（波形蛋白Vimentin、α-SMA）免疫熒光鑒定，本細胞純度可達90%以上；經(jīng)細胞外基質(zhì)分泌檢測驗證細胞功能正常；經(jīng)檢測不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等外源污染物，細胞活性達標。