大鼠胚胎成纖維細胞

大鼠胚胎成纖維細胞（Rat Embryonic Fibroblasts, REFs）分離自胚胎組織，是從妊娠中期（通常為胚胎發育12.5-14.5天）的大鼠胚胎中分離獲得的成纖維樣間質細胞，屬于貼壁生長的原代成纖維細胞，具有典型的成纖維細胞形態與生物學功能，是哺乳動物細胞生物學研究中常用的模式細胞之一。一般通過剔除胚胎的頭部、內臟（如心臟、肝臟）及四肢，保留軀干部分，酶消化分離獲得，典型形態為長梭形或不規則多邊形（生長形態特性與成纖維細胞相似），呈貼壁生長，培養過程中易形成方向性排列，增殖能力較強（原代至P5代前增殖活躍，隨傳代次數增加逐漸出現衰老現象）；可分泌多種細胞因子（如白血病抑制因子LIF、成纖維細胞生長因子FGF）、extracellularmatrix（ECM）成分（如膠原蛋白、纖連蛋白），為其他細胞生長提供微環境支持，能產生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子，故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性，且分泌效果優于外源添加的一些因子；表達成纖維細胞特異性標志物（如波形蛋白Vimentin），不表達上皮細胞標志物（如角蛋白Cytokeratin）；可用于干細胞培養支持，作為胚胎干細胞（ESCs）、誘導多能干細胞（iPSCs）的飼養層細胞，通過分泌LIF維持干細胞的未分化狀態與自我更新能力；體外研究模型，用于研究成纖維細胞功能（如ECM合成、細胞遷移）、胚胎發育機制、纖維化疾病（如肺纖維化、肝纖維化）的病理過程，以及藥物對間質細胞的作用效果；細胞衰老研究，REFs隨傳代自然衰老的特性，可用于探索細胞衰老的分子機制（如端粒縮短、氧化應激影響）及抗衰老藥物篩選；支持其他細胞培養，制備REFs條件培養基（培養REFs的上清液），為難以培養的細胞（如生殖細胞、神經細胞）提供生長所需的營養因子，或作為3D細胞培養的支架細胞構建類器官模型。不同種屬的胚胎成纖維細胞，在基礎形態、貼壁生長特性、核心分泌功能及常規培養條件上高度一致，但是存在種屬差異性，如細胞體積大小、分泌因子效果、對干細胞支持能力、可傳代次、藥物敏感性等等，一般優選大鼠胚胎成纖維細胞作為飼養層，需要依據不同實驗選擇適配。