人脂肪微血管內皮細胞

人脂肪微血管內皮細胞分離自人脂肪組織中的微血管，是構成脂肪組織微血管壁的核心功能細胞。核心功能為參與脂肪組織內的物質交換和氣體交換，調控脂肪組織的血液循環穩態；分泌多種血管活性物質和生長因子，參與脂肪組織的生長發育、代謝調控及血管新生過程，對維持脂肪組織的正常生理功能具有重要作用。功能異常與肥胖、糖尿病、脂肪代謝紊亂等代謝性疾病密切相關。原代培養3-4天后開始貼壁，初始形態呈圓形或短梭形；傳代后細胞可穩定維持內皮細胞的典型形態及功能。是研究脂肪組織代謝調控、代謝性疾病發病機制的重要實驗材料。

自備試劑：膠原酶Ⅰ型、PBS緩沖液、完全培養基、Percoll分離液、VEGF

培養基：人微血管內皮細胞完全培養基（含FBS、VEGF、堿性成纖維細胞生長因子、肝素、Penicillin、Streptomycin等）

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁生長，可形成單層內皮樣細胞層

細胞形態：圓形、短梭形、多邊形

傳代比例：1:2-1:3

傳代特性：可傳4-6代；2-4代以內細胞狀態最佳，功能最穩定

消化液：0.25%胰蛋白酶

人脂肪微血管內皮細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。

方法簡介：實驗室采用膠原酶消化法結合密度梯度離心法及VEGF誘導法制備該細胞，通過膠原酶分解脂肪組織釋放微血管片段，分離獲得單個核細胞后，經VEGF誘導分化并純化，最終獲得高純度的人脂肪微血管內皮細胞，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測：經內皮細胞特異性標志物（CD31、VEGFR2、Factor Ⅷ）免疫熒光鑒定，本細胞純度可達90%以上；經體外管腔形成實驗驗證細胞功能正常；經檢測不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等外源污染物，細胞活性達標。