兔肝成纖維細胞

兔肝成纖維細胞分離自兔肝臟間質組織，是構成肝臟間質的主要功能細胞。核心功能為合成和分泌膠原蛋白、彈性纖維等細胞外基質，構建肝臟的結構支架，維持肝臟的形態(tài)穩(wěn)定；分泌多種細胞因子，調控肝細胞的生長、分化和修復，參與肝臟微環(huán)境穩(wěn)態(tài)的維持；在肝臟損傷后可大量增殖，參與肝組織的修復過程，但過度增殖會導致肝纖維化。功能異常與肝纖維化、肝硬化、肝炎等肝臟疾病密切相關。原代培養(yǎng)2-3天后開始貼壁，初始形態(tài)呈短梭形或不規(guī)則形；傳代后細胞生長旺盛，可穩(wěn)定維持成纖維細胞的典型形態(tài)及功能。是研究肝臟生理功能、肝臟疾病發(fā)病機制及抗肝纖維化藥物篩選的重要實驗材料。

自備試劑：0.25%胰蛋白酶、膠原酶Ⅰ型、PBS緩沖液、完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基：兔肝成纖維細胞完全培養(yǎng)基（含FBS、成纖維細胞生長因子、維生素C、Penicillin、Streptomycin等）

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁生長

細胞形態(tài)：短梭形、長梭形

傳代比例：1:2-1:3

傳代特性：可傳6-8代；3-5代以內細胞狀態(tài)最佳，功能最穩(wěn)定

消化液：0.25%胰蛋白酶

兔肝成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介：實驗室采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備該細胞，通過特定消化體系溫和分解兔肝臟間質組織，分離獲得單個核細胞后，利用成纖維細胞與其他細胞貼壁速度的差異進行純化，最終獲得高純度的兔肝成纖維細胞，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測：經成纖維細胞特異性標志物（波形蛋白Vimentin、FSP1、α-SMA）免疫熒光鑒定，本細胞純度可達90%以上；經細胞外基質分泌檢測驗證細胞功能正常；經檢測不含有支原體、細菌、酵母和真菌等外源污染物，細胞活性達標。