大鼠冠狀動脈平滑肌細胞

大鼠冠狀動脈平滑肌細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型右優勢型、均衡型、左優勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干，發自左主動脈竇，經肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分，細胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na?通道、多種Ca2?通道和K?通道；它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化、超極化，調節血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動脈粥樣硬化的發展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此，原代分離培養的冠狀動脈平滑肌細胞，對研究生理和病理狀態下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

自備試劑： 0.25%胰蛋白酶  、PBS  、完全培養基

培養基： 大鼠冠狀動脈平滑肌細胞完全培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁生長

細胞形態： 成纖維細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

大鼠冠狀動脈平滑肌細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。

方法簡介 實驗室分離的大鼠冠狀動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠冠狀動脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。