兔角質(zhì)形成細(xì)胞

兔角質(zhì)形成細(xì)胞分離自兔皮膚表皮組織，是構(gòu)成皮膚表皮的主要功能細(xì)胞。核心功能為通過增殖、分化形成皮膚表皮的各層結(jié)構(gòu)（基底層、棘層、顆粒層、角質(zhì)層），構(gòu)建皮膚的物理屏障，抵御外界機(jī)械性損傷、病原體侵襲及水分流失；分泌多種細(xì)胞因子和抗菌肽，參與皮膚的免疫防御和炎癥調(diào)節(jié)；參與皮膚損傷后的修復(fù)過程，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。功能異常與濕疹、銀屑病、魚鱗病、皮膚腫瘤等皮膚疾病密切相關(guān)。原代培養(yǎng)3-4天后開始貼壁，初始形態(tài)呈圓形或多邊形；傳代后細(xì)胞生長旺盛，可穩(wěn)定維持角質(zhì)形成細(xì)胞的典型增殖分化功能。是研究皮膚生理功能、皮膚疾病發(fā)病機(jī)制及皮膚修復(fù)材料篩選的重要實驗材料。

自備試劑：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液、PBS緩沖液、完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基：兔甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基（含FBS、促甲狀腺激素、表皮生長因子、Penicillin、Streptomycin等）

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁生長，可形成濾泡樣結(jié)構(gòu)

細(xì)胞形態(tài)：多邊形、立方形

傳代比例：1:2

傳代特性：可傳4-6代；2-4代以內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)最佳，功能最穩(wěn)定

消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液

兔角質(zhì)形成細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介：實驗室采用胰蛋白酶-EDTA聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備該細(xì)胞，通過特定消化體系溫和分解兔皮膚表皮組織，分離獲得單個核細(xì)胞后，利用角質(zhì)形成細(xì)胞與其他細(xì)胞貼壁速度的差異進(jìn)行純化，最終獲得高純度的兔角質(zhì)形成細(xì)胞，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測：經(jīng)角質(zhì)形成細(xì)胞特異性標(biāo)志物（CK1、CK5、CK10、Involucrin）免疫熒光鑒定，本細(xì)胞純度可達(dá)90%以上；經(jīng)增殖分化功能檢測驗證細(xì)胞功能正常；經(jīng)檢測不含有支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等外源污染物，細(xì)胞活性達(dá)標(biāo)。